Stowarzyszenie genomu wirusowego z utratą przeszczepu u dzieci po transplantacji serca cd

Obejmowały one utrwalone w formalinie próbki pobrane podczas autopsji i snap-zamrożonej tkanki z eksplantowanych serc, które uzyskano w czasie przeszczepu od pacjentów z wrodzoną wadą serca lub przerostową kardiomiopatią. Przygotowanie szablonu i PCR
Próbki homogenizowano w RNAzolu za pomocą jednorazowych ręcznych homogenizatorów, a całkowite RNA i DNA wyizolowano jak opisano wcześniej.16,17,19 PCR z odwrotną transkryptazą zastosowano do wykrywania RNA enterowirusa, a do wykrycia DNA adenowirusa zastosowano PCR , wirus cytomegalii, wirus opryszczki pospolitej, parwowirus i wirus Epstein-Barr.2,16,17,19-21
Wszystkie próbki były analizowane przez techników, którzy nie mieli wiedzy na temat danych klinicznych lub serologicznych lub wyników hodowli, a wszystkie testy przeprowadzono w dwóch powtórzeniach. Obecność amplifikowalnego kwasu nukleinowego w każdej próbce została zweryfikowana za pomocą starterów zaprojektowanych do amplifikacji komórkowego kwasu nukleinowego (K-ras lub .-aktyny) .2,16,17,19-21
Analiza statystyczna
Analizę przeżycia zastosowano do określenia różnic w częstości występowania utraty przeszczepu związanej z wynikami analizy PCR. Test Wilcoxona zastosowano do oceny istotności statystycznej różnicy przeżycia między pacjentami z pozytywnymi wynikami na PCR i tymi z wynikami negatywnymi. Regresja logistyczna została wykorzystana do określenia związku pomiędzy utratą przeszczepu a liczbą epizodów odrzucenia oraz do oceny niezależnych asocjacji między wynikami PCR a utratą przeszczepu, a także między liczbą epizodów odrzucenia a utratą przeszczepu. W celu ustalenia, czy wśród chorych z wynikiem pozytywnym na PCR, obecność waskulopatii wieńcowej w przeszczepie była związana z utratą przeszczepu. Dokładne testy Fishera posłużyły do określenia istotności statystycznej wszelkich powiązań znalezionych w analizach tabeli kontyngencji. Wszystkie wartości P opierały się na dwustronnych testach statystycznych. Poziom alfa wynoszący 0,05 został użyty do odrzucenia hipotezy zerowej bez różnicy między grupami. Metodę Bonferroniego zastosowano do skorygowania zgłoszonych wartości P dla trzech testów statystycznych, które rozwiązały dwie główne hipotezy. Nominalne wartości P przedstawiono dla testów statystycznych, które wykorzystano w celu odniesienia się do drugorzędowych punktów końcowych badania, w tym typu wirusa, liczby epizodów odrzucenia i powiązania utraty przeszczepu z typem wirusa.
Wyniki
Próbki i pacjenci
Zbadano 553 seryjnych próbek biopsji endomiokardialnej od 149 pacjentów (zakres od do 17 na pacjenta w ciągu 5,5 roku badania, mediana, 3 próbki na pacjenta). Mediana wieku pacjentów w chwili przeszczepu wyniosła 2,3 miesiąca (zakres od 0,1 do 216), a po przeszczepie zakończono 657 pacjento-lat obserwacji (zakres od 4,2 do 145,3 miesiąca na pacjenta, mediana, 47,6).
Wyniki PCR
Rycina 1. Ryc. 1. Analiza PCR Pokazująca DNA Adenowirusa we wnętrzu prawej komory z endomiokardialną biopsją próbki pacjenta z ostrym odrzuceniem. Produkt wirusowy amplifikowano metodą PCR z 48 z 553 próbek biopsji (8,7 procent) z 34 ze 149 pacjentów (23 procent). W 30 próbkach (od 24 pacjentów) amplifikowano adenowirus, zazwyczaj typu 2 (rysunek 1)
[przypisy: przewlekłe ropne zapalenie migdałków podniebiennych, hiperostoza czołowa objawy, gruźlica prosówkowa ]
[hasła pokrewne: kryształy kwasu moczowego w moczu, tarcza międzykręgowa, kryształki kwasu moczowego w moczu ]