Stowarzyszenie genomu wirusowego z utratą przeszczepu u dzieci po transplantacji serca ad

Nasze badanie dotyczyło pośredniej obserwacji dzieci po przeszczepieniu serca, które poddano seryjnej analizie PCR w ramach rutynowego nadzoru w celu odrzucenia, a także pacjentom z klinicznymi dowodami odrzucenia oraz tym, którzy przeszli powtórną biopsję po otrzymaniu leczenia z powodu odrzucenia. . Główne hipotezy, które testowaliśmy, były takie, że przeżycie przeszczepu jest gorsze u pacjentów, którzy mają dodatni wynik PCR dla genomu wirusowego, niż u tych, którzy mają negatywne wyniki, a przeżycie przeszczepu jest gorsze u pacjentów, którzy mają więcej epizodów odrzucenia. Zbadaliśmy także związek pomiędzy liczbą epizodów odrzucenia a obecnością lub brakiem genomu wirusa na PCR, przeżywalności przeszczepu lub obu, a także, czy rodzaj wirusa wykrywanego przez PCR wpływa na ryzyko utraty przeszczepu i choroby naczyń wieńcowych w przeszczep. Metody
Pomiędzy styczniem 1993 r. A czerwcem 1998 r. Przeprowadzono seryjną analizę PCR wszystkich próbek prawej komory serca z biopsją serca uzyskanych od dzieci biorących udział w transplantacji serca w Szpitalu Dziecięcym Uniwersytetu Loma Linda. Te dzieci zostały włączone do badania w momencie przeszczepienia. Próbki biopsji były świeżo mrożone w ciekłym azocie i przechowywane w temperaturze -80 ° C przez okres do jednego miesiąca przed analizą, a następnie analizowane w partii. Wszystkie próbki analizowano metodą PCR pod względem adenowirusa, wirusa cytomegalii, enterowirusa, wirusa opryszczki pospolitej, parwowirusa i wirusa Epsteina-Barr. Analiza PCR została przeprowadzona w odległym miejscu, Baylor College of Medicine, w prospektywny, ślepy sposób.
Kultury wirusowe uzyskano, gdy były wskazane klinicznie, ale tylko niewielki procent próbek był hodowany. Histopatologiczna ocena próbek biopsyjnych została przeprowadzona zgodnie z kryteriami ISHLT.1 Standaryzowane kryteria ISHLT dla rozpoznania odrzucenia allograftu serca mieściły się w zakresie od 0 (bez odrzucenia) do klasy 4 (ostre ostre odrzucenie z rozproszonym, agresywnym, polimorficznym, zapalnym naciekiem oraz martwicę miocytów i uszkodzenia związane z obrzękiem, krwotokiem i zapaleniem naczyń). Wartości odrzucania między 0 a 4 reprezentują rosnący gradient stanu zapalnego, przy czym stopień 3A reprezentuje wieloogniskowe nacieki zapalne (wieloogniskowe umiarkowane odrzucenie) z pewnym uszkodzeniem miocytów, a stopień 3B reprezentuje rozproszony proces zapalny z uszkodzeniem miocytów i obrzękiem.23 Echokardiogramy uzyskano i oceniono do odrzucenie prospektywnie za pomocą opisanego wcześniej systemu wielowymiarowej komputerowej analizy.24,25
Pacjenci i próbki
Przebadaliśmy wszystkie dzieci, które przeszły transplantację serca, dla których dostępne były próbki biopsji endomiokardialnej prawej komory. Wszyscy pacjenci byli leczeni standardowym schematem cyklosporyny i azatiopryny. Odrzucenie leczono steroidami, innymi lekami przeciwreceptorskimi lub obydwoma, na podstawie badania klinicznego. Próbki biopsji seryjnej uzyskano po tym, jak rodzice pacjenta wyrazili pisemną świadomą zgodę i podczas rutynowego cewnikowania serca, które było częścią nadzoru do odrzucenia (zgodnie z protokołem), jak również od pacjentów z klinicznymi dowodami odrzucenia i jako następni. procedurę po tym, jak pacjent został poddany leczeniu w celu odrzucenia.
Kontroluj próbki
Próbki z biopsji z biopsji u pacjentów, u których nie stwierdzono zapalenia mięśnia sercowego, kardiomiopatii rozstrzeniowej lub innych procesów zapalnych w podziale na wiek i płeć, zastosowano jako kontrole negatywne.
[więcej w: ebola kraków, promazyna, metamina ]
[więcej w: naproxen hasco, tartriakson, braveran skład ]