Screening for Carriers of Tay-Sachs Disease wśród Żydów aszkenazyjskich – Porównanie testów opartych na DNA i enzymach ad 5

Utrata miejsca EcoRII tworzy fragment 52-bp z fragmentów 44-bp i 8-bp obecnych w normalnym allelu (ścieżki 11 do 14). Fragment o wielkości 52 pz wydaje się bardziej intensywny niż fragment o 44 bp, jak wcześniej zauważono Analiza DNA uciążliwych przewoźników
Tabela 1. Tabela 1. Analiza DNA u pacjentów z chorobą Tay-Sacha. Próbki od pacjentów z chorobą Tay-Sachsa i obligatoryjnych nosicieli (patrz Metody) analizowano w celu określenia proporcji alleli chorobowych u Żydów aszkenazyjskich, które mogły być uwzględnione przez trzy mutacje. Badane próbki DNA otrzymano od 42 aszkenazyjskich obligatoryjnych nosicieli, 11 pacjentów aszkenazyjskich (z odpowiednikiem 22 zmutowanych alleli), 6 nie-aszkenazyjskich nosicieli obligatoryjnych i 6 pacjentów niebędących aszkenazyjami (z odpowiednikiem 12 zmutowanych alleli). Spośród alleli od badanych aszkenazyjskich, 61 z 62 (98 procent) zostało zidentyfikowanych jako posiadające jedną z trzech znanych mutacji, podczas gdy z 20 alleli od osób niebędących aszkenazyjskimi, 4 (20 procent) miało mutację insercyjną. Pojedynczy pacjent Ashkenazi (linia komórkowa GM00515A) miał mutację insercyjną w połączeniu z niezidentyfikowaną mutacją.27 Tak więc tylko z 62 (2 procent) alleli obligatoryjnych pacjentów aszkenazyjskich miało niezidentyfikowaną mutację (Tabela 1). Ponieważ częstotliwość mutacji eksonu 7 byłaby obciążona dużą liczbą obligatoryjnych alleli od pacjentów z chorobą o początku dorosłości (n = 8), obliczono tylko częstość dwóch mutacji zidentyfikowanych jako powodujące infekcję choroby dla grupy Ashkenazi. Spośród tych dwóch mutacji mutacja insercji stanowiła 85 procent alleli i mutacja splicingowa 15 procent. Mutacja intronu 12 splicingowego złącza nigdy nie została znaleziona w stanie homozygotycznym lub w połączeniu z mutacją eksonu 7.
Analiza DNA próbek wcześniej testowana za pomocą testu enzymatycznego
Analiza próbek normalnych (bez nośnych)
Figura 2. Figura 2. Aktywność heksosaminidazy A w normalnych przedmiotach i nosicielach choroby Tay-Sachs, zgodnie z analizą DNA. W panelu pokazującym osoby badane w Toronto, szara strefa została włączona dla jasności, ale nierozstrzygające próbki nie zostały wykorzystane w badaniu. Wartości enzymów stanowią mieszaninę poziomów surowicy i leukocytów, chociaż większość wartości dla nośników określono w leukocytach. Każdy osobnik jest reprezentowany zgodnie ze statusem dla trzech badanych mutacji. Próbki są reprezentowane przez zmutowany allel, chociaż mają one jeden normalny allel w połączeniu z tym allelem.
W panelu pokazującym nosicieli badanych w Bostonie wartości oznaczone w surowicy są oznaczone x jeśli zmienili średni poziom heksozaminidazy A.
Pula próbek sklasyfikowanych jako normalne zgodnie z testem enzymatycznym została oceniona za pomocą testu DNA w celu ustalenia odsetka wyników fałszywie ujemnych. Średni poziom (. SD) heksozaminidazy A wynoszący 152 próbki normalne pod względem enzymatycznym (zarówno próbki surowicy, jak i leukocytów uzyskane z centrum Toronto) wynosił 66 . 5% (ryc. 2A). Badanie ich DNA leukocytów dla dwóch alleli powszechnych w chorobie dziecięcej ujawniło jedną próbkę, która zawierała mutację insercyjną (1 z 152 lub 0,7 procent). (Dwie próbki leukocytów od pacjenta były przechowywane w czasie pierwotnego testu enzymatycznego, obie zostały powtórnie przebadane, a wyniki wskazały status nosiciela na analizę DNA i stan normalny w teście enzymatycznym.) Gdy dodatkowa próbka od osobnika z mutacja insercji została przebadana, wyniki wskazują status nośnika zarówno na analizę enzymatyczną (46 procent poziomu heksosaminidazy A w leukocytach) i analizę DNA
[hasła pokrewne: cuchnący mocz, niewydolność lewokomorowa, ebola kraków ]