Analiza genotypów HLA-DQ i wrażliwości na cukrzycę zależną od insuliny

WŚRÓD białych, allele HLA-DR3 i HLA-DR4 powodują zwiększoną podatność na cukrzycę insulinozależną (IDDM), 2 3 4 5 6, ale istnieje coraz więcej dowodów na to, że allele w DQ zamiast w locus DR są bardziej intymne związane z tą zwiększoną wrażliwością.7 8 9 Zarówno cząsteczki HLA-DQ, jak i HLA-DR są heterodimerami złożonymi z łańcucha alfa (34 kd) i łańcucha beta (29 kd). Łańcuchy są niekowalencyjnie związane, a obie podjednostki są wewnętrznymi białkami błonowymi. Większość zmienności występuje w zewnętrznych domenach tych cząsteczek klasy II, a regiony polimorfizmu są prawdopodobnie związane z podatnością na choroby. Ponieważ region D kompleksu HLA koduje wiele polimorficznych cząsteczek (DP, DQ i DR), typowanie DQ technikami serologicznymi jest skomplikowane i niekompletne, a analiza polimorfizmu długości fragmentów restrykcyjnych na dużą skalę jest kłopotliwa. Jednak wprowadzenie analizy oligonukleotydów 10, 11 specyficznych dla alleli czyni takie badania wykonalnymi. Korzystając z oligonukleotydów specyficznych dla allelu, kilku badaczy doniosło, że brak kwasu asparaginowego w pozycji 57 łańcucha beta DQ zapewnia doskonały marker dla IDDM.12 13 14 W swoim oryginalnym badaniu z udziałem 39 pacjentów z IDDM, Todd i in. nie znaleziono żadnego pacjenta, który byłby homozygotą i tylko 3 pacjentów, którzy byli heterozygotyczni dla kwasu asparaginowego w pozycji 57 łańcucha beta HLA-DQ, co sugeruje, że obecność pojedynczego kwasu asparaginowego w tej pozycji była ochronna.13 W bardziej aktualnym badaniu z 27 rodziny z wieloma przypadkami IDDM, Morel i in. odkrył tylko jednego pacjenta, który był heterozygotyczny pod względem kwasu asparaginowego w pozycji 57 łańcucha beta DQ. Te wyniki sugerują, że genetyczna podatność na IDDM jest dominująca w jego związku HLA i że pojedynczy kwas asparaginowy w pozycji 57 łańcucha beta DQ nadaje allel -specific protection.15 Fakt, że analiza kwasu asparaginowego nie w pełni odpowiada za podatność na choroby jest ewidentna z badań prowadzonych w innych niż białe. Na przykład niektóre haplotypy u Japończyków mogą kodować kwas asparaginowy w pozycji 57 łańcucha beta DQ, jednak haplotypy te są pozytywnie powiązane z IDDM.9 Zastosowanie sond oligonukleotydowych do oceny podatności na chorobę jest atrakcyjne jako szybkie, niedrogie narzędzie, które może być wykorzystywane do badania dużej liczby osób, szczególnie krewnych pacjentów z IDDM. Takie podejście wymaga użycia osób kontrolnych i dużej liczby pacjentów z IDDM. Ponieważ w naszej klinice mieliśmy dużą, dobrze zdefiniowaną grupę pacjentów z IDDM, którzy przeszli pisanie HLA w innych badaniach, przetestowaliśmy wszystkich białych pacjentów dla większości alleli łańcuchów bety HLA-DQ, które można zidentyfikować za pomocą alleli. specyficzna analiza oligonukleotydów. W szczególności mieliśmy nadzieję potwierdzić i rozszerzyć poprzednie badania12 13 14 15, aby ustalić, czy ten test oparty na DNA może być wdrożony na szeroką skalę.
Korzystając z sond oligonukleotydowych specyficznych dla allelu i reakcji łańcuchowej polimerazy, przeanalizowaliśmy prawie 300 losowo wybranych białek z IDDM i ponad 200 niespokrewnionych zdrowych osób. Dla prawie wszystkich pacjentów typowanie HLA przeprowadzono niezależnie. Potwierdzamy związek z IDDM z allelami łańcucha beta DQ, które nie zawierają kwasu asparaginowego w pozycji 57
[patrz też: kryształy kwasu moczowego w moczu, pollakisuria, staloral 300 ]